Хроматограф NeoCHROM-STEROIDS
Стероидомика методом газовой хроматографии — масс-спектрометрии (ГХ-МС)
NeoCHROM-STEROIDS — газохроматографический комплекс с подтверждённым статусом медицинского изделия для диагностики in vitro (IVD). Решение предназначено для исследования стероидного профиля биологических образцов и может комплектоваться масс-спектрометрическим или пламенно-ионизационным детектором. Состав панели, тип образца и методика пробоподготовки определяются в соответствии с аналитической задачей и подтверждаются при валидации.
Стероидный профиль даёт лаборатории больше, чем результат для одного гормона. Одновременное исследование гормонов, их предшественников и метаболитов помогает проследить взаимосвязи между путями стероидогенеза и получить данные для комплексной клинической интерпретации.
Качественный и количественный анализ методом ГХ-МС
Современные решения для развёрнутого стероидного профиля используют газовую хроматографию с масс-спектрометрическим детектированием. ГХ-МС разделяет близкие по строению соединения, помогает идентифицировать их по времени удерживания и масс-спектру и определять концентрации по калибровке. Это особенно важно для стероидных изомеров, которые сложно различить только по хроматографическому пику.
Помимо концентраций отдельных аналитов, методика может предусматривать расчёт соотношений между метаболитами. Они помогают оценивать изменения в отдельных путях стероидогенеза. Для целевых методик комплекс также может комплектоваться пламенно-ионизационным детектором (ПИД).
Стероидный профиль мочи
Для мочи перспективным направлением является расширенная панель метаболитов стероидов. Опубликованные методики ГХ-МС демонстрируют одновременное определение 32 соединений из пяти групп:
- Прогестагены и их метаболиты: 17-гидроксипрегнанолон, прегнандиол, прегнентриол, прегнантриолон, прегнантриол.
- Минералокортикоидный путь: тетрагидро-11-дезоксикортикостерон, 5α-тетрагидрокортикостерон, тетрагидрокортикостерон, тетрагидро-11-дегидрокортикостерон.
- Глюкокортикоиды и их метаболиты: 11-кетоэтиохоланолон, 11β-гидроксиэтиохоланолон, тетрагидро-11-дезоксикортизол, тетрагидрокортизон, тетрагидрокортизол, 5α-тетрагидрокортизол, β-кортол, α-кортолон, β-кортолон, α-кортол, кортизол, 20α-дигидрокортизол.
- Андрогены и их метаболиты: 5α-андростандиол, андростерон, Δ5-андростендиол, этиохоланолон, дегидроэпиандростерон (ДГЭА), 11β-гидроксиандростерон, 16α-гидрокси-ДГЭА, андростентриол.
- Эстрогены: эстрон, эстриол, 17β-эстрадиол.
Приведённый перечень служит основой для разработки панели. Окончательный набор аналитов и пределы их количественного определения подтверждаются для методики NeoCHROM-STEROIDS при валидации.
Стероидный профиль сыворотки крови
Исследование сыворотки открывает другую аналитическую задачу: определение циркулирующих гормонов, их предшественников и продуктов превращения. Возможности одноквадрупольной ГХ-МС показаны на методике с 54 целевыми компонентами: 26 андрогенами, 9 эстрогенами, 5 прогестагенами, 6 кортикоидами и 8 стеролами.
В перечень аналитов, на основе которого может формироваться панель сыворотки, входят:
- Андрогены и их метаболиты: тестостерон, эпитестостерон, андростендион, дегидроэпиандростерон (ДГЭА), андростерон, этиохоланолон, 6β-гидроксиандростендион, 11β-гидроксиандростендион, 16α-гидроксиандростендион и 16α-гидрокси-ДГЭА.
- Эстрогены и их метаболиты: эстрон, 17β-эстрадиол, эстриол, 2- и 4-гидроксипроизводные эстрона и эстрадиола.
- Прогестагены и предшественники: прегненолон, прогестерон, 17α-гидроксипрегненолон, 17α-гидроксипрогестерон и 21-гидроксипрегненолон.
- Кортикоиды и их метаболиты: кортизол, кортизон, 11-дезоксикортизол, 6β-гидроксикортизол и 6β-гидроксикортизон.
- Стеролы: холестерин, 7α-гидроксихолестерин, 7β-гидроксихолестерин, 4β-гидроксихолестерин, 20α-гидроксихолестерин, 24S-гидроксихолестерин и 27-гидроксихолестерин.
Это примеры соединений из широкой панели, а не заявление об уже валидованном определении всех 54 компонентов на NeoCHROM-STEROIDS. Для сыворотки и плазмы состав панели и аналитические характеристики проверяются отдельно.
Пробоподготовка с учётом типа образца
Методика для мочи может включать экстракцию, гидролиз конъюгированных стероидов, повторную очистку и дериватизацию перед анализом ГХ-МС. Для сыворотки и плазмы требуется отдельный подход: выделение целевых соединений, очистка от компонентов матрицы и дериватизация. Гидролиз применяют тогда, когда задача предусматривает определение конъюгированных форм.
Последовательность пробоподготовки подбирается вместе с перечнем аналитов. При валидации проверяются селективность, воспроизводимость и пределы количественного определения для выбранного типа образца.
Продолжительность анализа и производительность
Хроматографический цикл длится 45–90 минут в зависимости от методики и состава панели. Это соответствует приблизительно 5–10 инъекциям за 8 часов или 16–32 инъекциям за сутки на одном аналитическом канале без учёта пауз. Фактическое количество результатов планируют с учётом пробоподготовки, калибровки, холостых и контрольных образцов.
Расскажите нам, какие аналиты и биологические образцы нужны вашей лаборатории. Предложим состав панели, конфигурацию комплекса и методику для проверки под вашу аналитическую задачу.
Подобрать хроматограф
Опишите объект анализа, компоненты, ожидаемые концентрации и нормативный метод. Инженеры NeoChrom предложат конфигурацию прибора для конкретной аналитической задачи.